Часы t: Официальный сайт Tissot | Официальный интернет магазин швейцарского часового бренда TISSOT (тиссот) Россия

T-Clock Redux — это ответвление более старого проекта под названием T-Clock 2010, целью которого является продолжение работы первоначального разработчика и предоставление простых средств для улучшения функциональности стандартных часов Windows.

Как только вы установите T-Clock Redux на свой компьютер, вы увидите, что формат часов на панели задач изменился.Достоинства находятся в меню, вызываемом правой кнопкой мыши, которое обеспечивает доступ одним щелчком к настройкам часов и множеству других инструментов, как описано ниже.

Улучшает часы и добавляет будильники и таймеры в Windows

Поскольку T-Clock Redux стремится улучшить часы Windows, он меняет свой формат по умолчанию, а также показывает второй счетчик, текущий день и дату. Однако вы можете изменить формат времени в окне «Параметры» приложения. В том же окне вы можете настроить его еще больше и изменить шрифт и размер, цвета и тип фона, а также положение часов на панели задач.

В отличие от часов Windows, T-Clock Redux имеет настраиваемые будильники, которые вы можете настроить, чтобы предупреждать вас о важном предстоящем событии или, почему бы и нет, использовать их для установки ежечасных звуковых сигналов в качестве напоминания о том, что нужно сделать перерыв в работе и расслабить глаза.

Помимо сигналов тревоги, T-Clock Redux также имеет таймеры и секундомеры, которые вы можете настроить, чтобы проверить, сколько времени требуется для выполнения задачи. В список наблюдения можно включить несколько таймеров для отслеживания текущих действий.

Обеспечивает быстрый доступ к важным инструментам Windows

Интересным в T-Clock Redux является то, что его набор функций не ограничивается улучшением функциональности часов Windows.Вместо этого вы будете удивлены, узнав, что он также предоставляет инструменты повышения производительности, предназначенные для улучшения вашего рабочего процесса.

Например, он поставляется с опциями для управления открытыми окнами, для доступа к диспетчеру задач и быстрого открытия раздела управления звуком или свойств отображения. Кроме того, T-Clock Quickys содержит ярлыки для часто используемых инструментов, таких как проводник Windows, командная строка и параметры синхронизации времени. Кроме того, он позволяет с легкостью очистить корзину и получить доступ к 3-месячному календарю T-Clock.

Стандартные параметры питания в Windows также доступны в главном меню T-Clock Redux, что означает, что вы можете быстрее выключить и перезагрузить компьютер.

Инструменты повышения производительности, замаскированные под служебную программу для улучшения часов.

T-Clock Redux предназначен для того, чтобы помочь вам использовать область лотка для повышения общей производительности. Помимо улучшения часов Windows, он предлагает дополнительные функции, которые упрощают вам открытие основных приложений и инструментов в Windows без необходимости выполнять поиск.

Подано под

Enhance Windows Clock Будильник Установить таймер Часы Таймер Будильник

Динамика сериновой петли лежит в основе дифференциального сродства криптохромов к CLOCK: BMAL1 для управления суточным ритмом

[Примечание редакции: авторы повторно представили исправленную версию статьи на рассмотрение. Далее следует ответ авторов на первый раунд проверки.]

Рецензент №1: Рукопись Фрибурга и др., касается структурной основы регуляции циркадного ритма двумя паралогическими репрессорами транскрипции, CRY1 и CRY2, и их модулятором, PER2. […] Наконец, крио-ЭМ и связанное с ним структурное моделирование, основанное на крио-ЭМ, страдают от ограничений, которые делают его неясным для рукописи.

Мы благодарим рецензента №1 за тщательное и внимательное рассмотрение нашей рукописи. Мы согласны с тем, что это исследование дает представление о нерешенном вопросе о том, как PER2 влияет на сродство криптохромов к CLOCK: BMAL1.Мы полагаем, что локализация молекулярной основы этого дифференциального сродства к сериновой петле в домене PHR CRY представляет собой важный шаг в нашем понимании молекулярных циркадных часов. Однако другой ключевой вывод, который, возможно, не был оценен рецензентом, — это наше открытие, что CRY1 имеет очень высокое сродство к ядру домена PAS CLOCK: BMAL1, что обеспечивает молекулярную основу для понимания предыдущих наблюдений из исследований ChIP-seq, которые CRY1 может действовать самостоятельно как репрессор CLOCK: BMAL1 в конце циркадного цикла.Мы также согласны с тем, что качество крио-электромагнитных данных было не таким высоким, как мы надеялись, учитывая проблемы с междоменной гибкостью CLOCK: BMAL1 и жесткую предпочтительную ориентацию комплекса во льду. Мы опишем это более подробно ниже, но мы полагаем, что мы рассмотрели озабоченность рецензента №1 ограничениями крио-ЭМ-данных, удалив трехмерную модель и вместо этого используя средние значения класса 2D для проверки вычислительной модели троичного PER2: CRY1. : ЧАСЫ комплекс.

В целом, мы полагаем, что наше исследование привело к трем открытиям, которые важны для циркадных ритмов: (1) показывая, что дифференциальные репрессивные функции CRY1 и 2, вероятно, происходят не из их сродства к BMAL1 TAD, а из домена PAS ядро CLOCK: BMAL1, мы выделяем критически важный интерфейс белок-белок, который, вероятно, будет регулироваться для управления синхронизацией часов; (2) наше открытие, что PER2 действует, чтобы уравнять сродство CRY1 и CRY2 к CLOCK: BMAL1 посредством модуляции сериновой петли обеспечивает основанное на структуре обоснование сборки и функции CRY1 / 2-содержащих ранних репрессивных комплексов, и (3) наши открытие очень высокого сродства CRY1 к CLOCK: BMAL1 в отсутствие PER2 обеспечивает основу для понимания его важной, но загадочной роли в позднем репрессивном комплексе.

Существенные изменения: 1) Название статьи кажется мне слишком общим, граничащим с незначительным, поскольку динамика белков регулирует биохимию во всех контекстах, а не только циркадные ритмы. Какой механистический вывод о белках CRY1 / 2 и PER авторы предложили бы в качестве названия eLife, которое передает значение их открытия?

Мы признаем, что наше первоначальное название было слишком широким и не полностью описывало объем исследования.Мы изменили название на «Динамика сериновой петли лежит в основе дифференциального сродства криптохромов к CLOCK: BMAL1 для управления суточным ритмом».

2) Мне было трудно ориентироваться в разнообразных изображениях построек. Если рисунок 1A определяет стандартный вид, добавьте сюда четкие метки для сериновой петли, вторичного кармана, отпечатка домена PAS и отпечатка домена TAD, а затем используйте этот рисунок со стандартными символами поворота, чтобы помочь читателю понять какие особенности поверхности рассматриваются и выделяются на следующих рисунках.

Спасибо за предложение. Мы определили стандартный вид белка на рисунке 1A и использовали его с соответствующими символами вращения на следующих рисунках, чтобы сориентировать читателя. Мы также изменили нашу стратегию маркировки, чтобы избежать путаницы. Мы считаем, что это должно улучшить способность ориентироваться в структурных изображениях, представленных в рукописи.

3) МД моделирования — это наводящие на размышления мелкозернистые структурные гипотезы, но я не считаю их экспериментальными данными.Я рад видеть такие модели в дополнительных данных, но мне не ясно, насколько они были полезны при размышлении о различиях между CRY1 и CRY2 или о последствиях связывания PER2 для белков CRY. Например, меня может смутить рисунок 3, предполагающий, что модели мутаций CRY2 => CRY1 (мутант 7M) проявляют самые сильные эффекты для остатков, находящихся далеко от сериновой петли (около aa250 и aa300), в то время как сериновая петля и особенно вторичный карман (около aa400) менее впечатляюще изменен в RMSF.

Мы ценим мнение рецензента о том, что МД-симуляции могут заставлять задуматься, и вежливо призываем рецензента подумать о том, насколько широко они использовались для внесения важного вклада в изучение динамики и функции биомолекул. Мы считаем, что моделирование MD вносит очень важный вклад в наше понимание динамики сериновых петель в криптохромах и должно оставаться в основных фигурах.

Что касается вопроса о том, насколько они были полезны при размышлении о различиях между CRY1 и CRY2, мы считаем, что моделирование MD сыграло здесь решающую роль, дополнив наши экспериментальные данные о связывании и предоставив молекулярный механизм, связывающий динамику серина. петля возле вторичного кармана к сродству криптохромов для ЧАСОВ: BMAL1.Статические кристаллические структуры CRY1 и CRY2 только предполагают, что различия в гибкости существуют в сериновой петле; поэтому не было ясности в отношении факторов, которые могут привести к дифференциальной гибкости, и того, играет ли это роль в функциональной разнице, наблюдаемой между CRY1 и CRY2. Чтобы ответить на этот комментарий (и один от обозревателя №2), мы добавили новый анализ моделирования MD, чтобы продемонстрировать, что замена двух остатков из CRY1 в сериновую петлю CRY2 (то есть mutCRY2) не только повторяет CRY1-подобную гибкость в петлю, но также и ее образец водородных связей и ландшафт свободной энергии.Кроме того, мы добавили биохимическую характеристику мутанта CRY2 2M, вдохновленного MD, чтобы продемонстрировать, что различия последовательностей в петле, которые изменяют ее динамику, действительно модулируют сродство CRY к CLOCK: BMAL1.

Что касается примера, выбранного рецензентом для различий RMSF, мы подчеркиваем, что белки являются динамическими по своей природе, и моделирование MD отлично справляется с захватом этой динамики с помощью вычислений. Обе области, выделенные рецензентом, действительно являются гибкими петлями, которые демонстрируют значительную конформационную гетерогенность с высокими B-факторами в кристаллических структурах всех CRY. Даже в траекториях моделирования значения RMSF показывают большое стандартное отклонение для этих остатков. С другой стороны, сериновая петля и вторичный карман в апо CRY2 в основном состоят из вторичных структур, таких как a-спирали и b-нити, которые обычно считаются относительно жесткими. Таким образом, мы считаем, что увеличение их гибкости из-за двух мутаций в сериновой петле является функционально значимым, независимо от величины по сравнению с другими длинными гибкими петлями.

4) Авторы используют излишнюю полемику при описании предшествующей структуры как «нефизиологической» и «артефакта».Да, векторные остатки представляют собой проблему, но все кристаллические структуры имеют ограничения. Я бы посоветовал авторам описать свою работу как попытку собрать объяснительную силу из всех доступных структурных данных, которые при рассмотрении вместе предполагают значительную гибкость и возможности для регулятивного ремоделирования в этой области CRY1 / 2.

Мы полностью согласны с рецензентом здесь — мы не пытались использовать чрезмерно спорную риторику, но мы считаем, что необходимо отметить, что векторная последовательность, включенная в конструкцию PER2, используемую в предыдущей структуре, обеспечивала неверное изображение структура сериновой петли в комплексе CRY1: PER2.Мы согласны с тем, что смягчение языка здесь заслуживает, поэтому мы изменили язык в этом разделе и переместили панель с исходного рисунка (четко обозначая артефакт) на дополнительный рисунок.

5) Авторы писали, что они попытались разрешить выдающуюся неоднозначность в отношении структуры PER2 (CBD) CRY1 (PHR): ЧАСЫ: BMAL1 (bHLH-PAS) + дцДНК с помощью криоЭМ с одной частицей. Я боюсь, что неопределенность остается, а данные крио-ЭМ и связанный с ними анализ неполны и не связаны с остальной частью исследования.Несмотря на заявленное разрешение от ~ 6Ã… до ~ 7Ã…, я могу оценить только несколько очевидных Î ± -спиратов на рисунках. По большей части на карте отсутствует разделение элементов вторичной структуры, что не позволяет надежно интерпретировать их карту. Несмещенные средние по классам, показанные на рисунке 4 — приложение к рисунку 2B, лишь частично напоминают проекции псевдоатомной модели автора. Таким образом, хотя их примерка с низким разрешением может быть разумным предположением, я не могу одобрить эту структурную модель, основанную на представленных крио-ЭМ данных.

Мы согласны с рецензентом №1 о неудовлетворительно низком разрешении наших криоЭМ исследований одиночных частиц. В нашей оригинальной рукописи мы отметили, что оценка разрешения, представленная Relion, вероятно, завышена из-за предпочтительной ориентации: «В нашей крио-ЭМ плотности наблюдалась некоторая анизотропия, возникающая из-за того, что частицы принимали две предпочтительные ориентации в застеклованном льду (рис. S6), что было пагубно сказывается на разрешении нашей 3D-реконструкции и, вероятно, приводит к завышению значения для нашей окончательной карты.Вероятно, это происходит из-за взаимодействия с поверхностью раздела воздух-вода с нашим комплексом, как это обычно наблюдается в других образцах белка, проанализированных с помощью крио-ЭМ … «

Мы были разочарованы динамической природой многодоменного комплекса (задокументированной ранее в исследованиях малоуглового рассеяния рентгеновских лучей, Michael et al., (2017)) и несколькими предпочтительными ориентациями комплекса, с которыми мы боролись на протяжении всей нашей ЭМ. исследования. В конце концов, мы сочли, что наличие некоторых экспериментальных данных, подтверждающих связывание CLOCK PAS-B со вторичным карманом комплекса CRY1: PER2, стоит включить в первоначальный черновик рукописи.Мы признаем, что низкое разрешение нашей 3D-карты оставляет некоторую двусмысленность в структурной интерпретации 3D-модели, поэтому мы удалили 3D-карту из этого исследования, вместо этого придавая большее значение средним значениям 2D-класса, полученным из того же набора данных. Мы отмечаем, что в отличие от нашей трехмерной карты, эти средние значения 2D-класса содержат хорошо разрешенные вторичные структурные особенности для CRY1 PHR и с меньшей вероятностью страдают от такой же неоднозначности в интерпретации. Кроме того, мы включили более подробное сравнение двухмерных классов и прямых проекций двух псевдоатомных моделей HADDOCK, получивших наибольшее количество баллов (рисунок 4 — приложение к рисунку 2B).Важно отметить, что данные EM смогли четко поддержать одну из двух моделей, чтобы обеспечить лучшую картину тройного комплекса между PER2, CRY1 и CLOCK. Тем не менее, мы с уважением не согласны с рецензентом №1 в его оценке о том, что наш анализ EM не связан с общими результатами исследования. На сегодняшний день все еще не существует доступной структуры с высоким разрешением, описывающей взаимодействия между факторами циркадной транскрипции млекопитающих и их репрессорами, что придает нашей модели значительную ценность для циркадного сообщества.С этой целью данные EM сыграли важную роль в выборе наиболее вероятной структурной модели, полученной на основе интегративных результатов MD и HADDOCK. Мы добавили новый текст в подраздел «Сериновая петля CRY1 неупорядочена в комплексе CRY1 PHR: PER2 CBD», описывающий эту новую работу.

Reviewer # 2: 1) Было бы неплохо, если бы авторы могли лучше объяснить силы, которые стабилизируют различные конформации сериновых петель. Учитывая, что они используют моделирование молекулярной динамики для генерации гипотез, они могут использовать моделирование ограниченного возмущения свободной энергии, например, для выявления взаимодействий, благоприятствующих различным конформациям.Или попробуйте более систематично нанести на карту (бесплатные) энергетические ландшафты.

Мы согласны с тем, что обсуждение взаимодействий, стабилизирующих различные конформации сериновой петли, было бы ценным дополнением к рукописи. Однако выполнение моделирования возмущений ограниченной свободной энергии было бы дорогостоящим с точки зрения вычислений, и мы полагаем, что это выходит за рамки данной рукописи. Чтобы более систематически исследовать конформации сериновых петель согласно предложению рецензента, мы построили графики ландшафтов свободной энергии (ЛСЭ), соответствующие объему и расстоянию на входе во вторичный карман.FEL четко показывает разницу в относительном распределении кадров по объему и расстояниям между CRY1, CRY2 и mutCRY2 (Рисунок 3 — приложение к рисунку 1D). Мы также извлекли кадры, соответствующие минимуму в каждом ЛСЭ, и сравнили их объем и расстояние. Они снова показали ту же тенденцию, что и средние значения, упомянутые в исходной рукописи, при этом mutCRY2 ведет себя аналогично апо CRY1 (дополнительный файл 1).

Что касается характеристики взаимодействий, стабилизирующих сериновую петлю, здесь трудно комментировать взаимодействия PER2, поскольку моделирование здесь было выполнено для апо CRY1 и CRY2.Мы согласны с тем, что это интересный путь к пониманию динамики этого цикла и его взаимодействия с PER2 и CLOCK PAS-B. Это часть продолжающейся работы, которую мы проводим над другой рукописью. Однако, принимая во внимание предложение рецензента, мы проанализировали водородные связи, образованные остатками вторичных карманных петель на протяжении траекторий, описанных в рукописи, и добавили новый текст, описывающий работу в подразделе «Сериновая петля дифференциально закрывает доступ к вторичным петлям». карман CRY1 и CRY2 »и в дополнительном файле 2.Мы считаем, что этот анализ придает большую глубину исследованию, и благодарим рецензента за предложение продолжить это направление исследования.

2) Это потенциально представляет интерес для читателей, помимо тех, кто работает с циркадными часами, поскольку общие различия в функциях родственных белков (например, изоформ) не совсем понятны, по крайней мере, количественно. В связи с этим рукопись могла бы быть написана более доступной для читателей, менее знакомых с часами.

Мы согласны с рецензентом в том, что фундаментальные результаты этого исследования могут быть интересны поклонникам белка за пределами области циркадных часов. Мы внесли небольшие изменения в текст по всей рукописи, чтобы сделать ее более доступной для читателей, не работающих на часах. Однако, по сути, это исследование затрагивает важный вопрос о функции молекулярных циркадных часов, и мы чувствуем, что необходимо сформулировать наши выводы в свете транскрипционного / трансляционного осциллятора, а не более общих принципов поведения белков. Сосредоточение внимания на этом общем аспекте нашего исследования может стать отличной идеей для будущего обзора по этой теме.

Рецензент № 3: 1) Эксперименты на Рисунке 1C и Рисунке 2 должны были быть выполнены с типом отрицательного контроля, например с использованием фотолиазы или Drosphila CRY (так как у них есть небольшая полость в их вторичном пакете), чтобы подтвердить их результаты.

Мы согласны с рецензентом в том, что отрицательные контроли имеют первостепенное значение. В этом случае отрицательные контроли для этих анализов уже были выполнены в другом месте, и эти исследования надлежащим образом процитированы. Мы со всем уважением не согласны с тем, что использование известного нерепрессивного гомолога, такого как E.coli фотолиаза или Drosophila CRY будет лучшим контролем в этом анализе. Отрицательные контроли для анализа связывания TAD на основе флуоресцентной поляризации (FP) на рисунке 1C были первоначально опубликованы в Xu et al., (2015), где мы использовали мутанты TAD, которые снижали репрессию CRY в клетках 293T, а также показали снижение сродства к CRY как FP, так и ITC, два золотых стандарта для определения аффинности; более того, аффинити, которые мы здесь измеряем, соответствуют данным, которые мы опубликовали ранее.Отрицательные контроли для связывания CRY с ядром домена PAS CLOCK: BMAL1 были опубликованы в Michael et al., (2017), где мы показали, что точечный мутант W362A CLOCK значительно нарушает или полностью устраняет взаимодействие CLOCK с CRY1 по размеру. эксклюзионная хроматография и анализы с понижением частоты in vitro. Обе эти цитаты сделаны в тексте при описании предшествующих знаний в этой области, поэтому мы считаем, что это должно решить главную проблему рецензента.

2) Репрессионный анализ (обычно проводится в полевых условиях) следует проводить с использованием соответствующей клеточной линии, чтобы подтвердить вывод, указанный в разделе «Результаты».

Способность CRY1 и CRY2 подавлять CLOCK: BMAL1 независимо от PER2 была опубликована много лет назад в Shearman et al. (2000) с использованием трансфекции в гетерологичную систему клеток насекомых на основе S2. Более того, это наблюдение повторяется в многочисленных работах, в некоторых из которых исследуется природа репрессии, когда CRY экспрессируются отдельно или с PER2 (например, Akashi et al., (2014)). Акцент в этом заключительном предложении был сделан, чтобы суммировать наши текущие открытия, что оба белка CRY связывают TAD сходным образом (с PER2 или без него).Чтобы связать это утверждение с наблюдением, что секвестрация TAD с помощью CRY, вероятно, является моделью, с помощью которой они напрямую подавляют активность CLOCK: BMAL1, мы добавили ссылку на нашу более раннюю работу, где мы показали, что CRY1 и домен KIX коактиватора CBP напрямую конкурируют за один и тот же сайт связывания на TAD BMAL1 (например, в Xu et al., (2015)). Мы считаем, что привязка резюме наших текущих результатов к этому предыдущему исследованию, в котором строго изучалось связывание TAD с исследованиями in vitro и клеточной репрессии, должна служить надлежащим подтверждением этого утверждения.

3) Трудно поверить, связывается ли CRY2 с C: B bHLH-PAS, поскольку пик CRY2 PHR: C: B bHLH-PAS и C: B bHLH-PAS перекрывается с рисунком 2B. Для проверки некоторых других типов CRY от растений / насекомых в обоих экспериментах. В качестве альтернативы тримерный комплекс необходимо показать либо с помощью SDS PAGE (как показано на рисунке 2 — рисунок в приложении 1), либо с помощью вестерн-блоттинга.

Мы подтверждаем точку зрения автора обзора, хотя мы указываем, что связывание гетеродимера bHLH-PAS с доменом CRY1 PHR аналогичного размера значительно смещает профиль элюции комплекса, и нет оснований полагать, что CRY2 PHR будет вести себя. существенно отличается в этом анализе.Однако, чтобы прояснить любую потенциальную путаницу, мы добавили гель SDS-PAGE из обоих прогонов хроматографии (с маркерами объема) на рисунок 2 — рисунок в приложении 1, который ясно показывает, что хроматографические пики для CRY2 и гетеродимера CLOCK: BMAL1 не соответствуют перекрывать. Мы со всем уважением не согласны с рецензентом в том, что нам нужно запустить отрицательный контроль, используя здесь нерепрессивный CRY от растений или насекомых, поскольку данные совершенно ясны, что CRY2 нестабильно мигрирует с CLOCK: BMAL1. Мы также исследовали комплексообразование CRY2 с гетеродимером bHLH-PAS с помощью эксклюзионной хроматографии в соответствии с многоугловым рассеянием (SEC-MALS), которая обеспечивает независимое от формы определение массы для однозначного подтверждения образования комплекса.Однако в соответствии с данными SEC, представленными здесь, мы идентифицировали массы только для изолированного гетеродимера CLOCK: BMAL1 и домена PHR CRY2, а не для их комплекса (данные не показаны). Таким образом, мы считаем, что добавление SDS-PAGE на рисунке 2 — рисунок в приложении 1 должно удовлетворить опасения автора обзора, что мы, возможно, пропустили образование стабильного комплекса между CRY2 PHR и гетеродимером bHLH-PAS.

4) Подраздел «Сериновая петля по-разному обеспечивает доступ к вторичному карману CRY1 и CRY2»: изменение RMSF четко не показано на рисунке 3D для A61G.Хотя они цитировали статьи (мутанты, которые использовались в этих статьях, отличаются от CRY2 A61G), они должны подтвердить свои выводы с помощью CRY2-A61G, измерив мутантную репрессорную способность и ее влияние на циркадный ритм с использованием линии клеток CRY с двойным нокаутом MEF.

Обозреватель подчеркивает, что мутанты, использованные в Rosensweig et al., (2017), в некоторых случаях немного отличаются от тех, которые были исследованы в наших анализах здесь. Однако это верно лишь отчасти, поскольку мы целенаправленно изучали мутант CRY2 7M биохимически, потому что он уже был подтвержден в строгих клеточных исследованиях Rosensweig et al.В этой рукописи мы добавили экспериментальные данные, чтобы поддержать моделирование с помощью МД mutCRY2, зондирования CRY2 PHR с помощью мутаций A61G / N64S, которые заменяют два остатка из CRY1 на CRY2, чтобы дестабилизировать динамику сериновой петли. Rosensweig et al. Изучали обратный мутант в своих исследованиях клеточного восстановления — они создали мутант G43A / N46S в CRY1, чтобы показать, что он ослабляет репрессию и сокращает циркадный период, в соответствии с их моделью, согласно которой этот мутант имел более слабый, больший CRY2. -подобный репрессивный фенотип.Наша логика использования мутанта CRY2 2M (вместо создания соответствующего мутанта CRY1, такого как Rosensweig et al.) Заключалась в том, что это позволило бы провести прямое сравнение с аффинностью, полученной нами с мутантом CRY2 7M. Мы добавили текст в этот черновик (подраздел «Сериновая петля по-разному закрывает доступ к вторичному карману CRY1 и CRY2»), чтобы объяснить эту связь. В связи с этим мы полагаем, что данные с мутациями CRY2 2M и 7M были надлежащим образом подтверждены цитатами.

5) Подраздел «Сериновая петля по-разному обеспечивает доступ к вторичному карману CRY1 и CRY2», эти данные демонстрируют небольшие различия последовательностей…. «Я не согласен с этим утверждением. CRY2 7M состоит из семи мутаций внутри вторичного пакета и вокруг него, и такое количество мутаций может усложнить ситуацию.

Мы согласны с составителем обзора в том, что семь мутаций не кажутся скромным числом, но мы имели в виду сами фактические замены аминокислот, в которых остатки аналогичного размера и / или химического характера были заменены друг на друга (т. Е. K / R, E / D, W / F и т. Д.). Однако мы признаем, что эта характеристика неясна, поэтому мы удалили слово «скромный» из нашего описания мутанта 7M в подразделе «Сериновая петля по-разному обеспечивает доступ к вторичному карману CRY1 и CRY2».

Знаменитые шотландские часы, которые всегда бегают быстро, не вернутся назад: NPR

Часы в отеле Balmoral в Эдинбурге, Шотландия, традиционно идут на три минуты быстрее и возвращаются к среднему времени по Гринвичу только 31 декабря. В этом году они будут продолжать работать быстро.